雙重CRISPR療法+長(zhǎng)效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物，清除體內(nèi)HIV病毒
艾滋?。ˋIDS）是獲得性免疫缺陷綜合征的簡(jiǎn)稱，由感染HIV病毒引起。HIV是一種能攻擊人體免疫系統(tǒng)的逆轉(zhuǎn)錄病毒，它把人體免疫系統(tǒng)中重要的CD4 T細(xì)胞作為主要攻擊目標(biāo)，大量破壞該細(xì)胞，經(jīng)過(guò)數(shù)年、甚至長(zhǎng)達(dá)10年或更長(zhǎng)的潛伏期后發(fā)展成艾滋病病人，使人體喪失免疫功能，因抵抗力極度下降會(huì)出現(xiàn)多種感染，后期常常發(fā)生惡性腫瘤，以至全身衰竭而死亡。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)告，全世界有超過(guò)3800萬(wàn)艾滋病患者。
雖然抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法（ART）可以控制艾滋病的進(jìn)展，甚至能讓艾滋病感染者像正常人一樣生活，但該療法并不能治愈艾滋病，只是將體內(nèi)的HIV病毒壓制在較低的水平。 患者必須終生堅(jiān)持每日服藥，一旦停藥，體內(nèi)的HIV病毒就能夠迅速?gòu)?fù)制，進(jìn)而導(dǎo)致艾滋病發(fā)展。
對(duì)于絕大多數(shù)艾滋病患者來(lái)說(shuō)，徹底治愈艾滋病的較大障礙就是體內(nèi)的病毒庫(kù)，也就是隱藏在細(xì)胞中的HIV病毒，如何徹底清除體內(nèi)病毒庫(kù)，才是治愈艾滋病的關(guān)鍵。
2023年5月1日，美國(guó)天普大學(xué)和內(nèi)布拉斯加大學(xué)醫(yī)學(xué)中心的研究人員在《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》（PNAS）上發(fā)表了題為：CRISPR editing of CCR5 and HIV-1 facilitates viral elimination in antiretroviral drug-suppressed virus-infected humanized mice 的研究論文。
該研究表明，使用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)，敲除CCR5基因，并靶向HIV-1病毒的LTR-Gag，結(jié)合長(zhǎng)效緩釋抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法（LASER ART），能夠在約60%的人源化小鼠模型中完全清除HIV-1病毒。
2019年7月，該團(tuán)隊(duì)在 Nature Communications 期刊發(fā)表論文【2】，該研究開發(fā)了一種長(zhǎng)效緩釋抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法（LASER ART），將其與CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)結(jié)合，29%的人源化小鼠模型體內(nèi)的HIV病毒被完全清除。這是從活體動(dòng)物的基因組中清除HIV，標(biāo)志著在治愈HIV感染中的關(guān)鍵突破。一年后，該團(tuán)隊(duì)將這項(xiàng)研究推進(jìn)到了非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中，該研究結(jié)果于2020年11月發(fā)表在了 Nature Communications 期刊 【3】。
在感染后不久，HIV病毒就會(huì)將自身基因組整合到人類基因組中，因此，僅依靠目前的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法（ART）只能抑制HIV病毒而無(wú)法治愈。HIV病毒仍然存在于患者全身，因此必須在余生中的每一天服用藥物來(lái)抑制它們，而這可能導(dǎo)致耐藥性和其他并發(fā)癥。這也是為什么我們需要開發(fā)一種能夠清除體內(nèi)HIV病毒的治療方法，只有這樣才能真正治愈艾滋病。
在這項(xiàng)新研究中，研究團(tuán)隊(duì)制定了一項(xiàng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)难芯糠桨?，首先給感染了HIV的人源化小鼠模型注射長(zhǎng)效緩釋抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物（LASER ART）。一個(gè)月后，研究團(tuán)隊(duì)使用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)來(lái)敲除這些小鼠的CCR5基因。CCR5是HIV-1病毒感染和入侵人類細(xì)胞的受體，CCR5基因的缺失會(huì)導(dǎo)致HIV病毒無(wú)法進(jìn)一步感染和在細(xì)胞間擴(kuò)散。根據(jù)此前的研究數(shù)據(jù)，基因編輯后7天，CCR5表達(dá)水平降至較低。此時(shí)，研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了第二次CRISPR-Cas9基因編輯，靶向LTR-Gag，用來(lái)清除整合在基因組中的HIV-1 DNA，這一步與該團(tuán)隊(duì)在2019年發(fā)表的研究一致。
接下來(lái)，研究團(tuán)隊(duì)繼續(xù)觀察了這些小鼠2個(gè)月時(shí)間，研究團(tuán)隊(duì)使用多種高靈敏性檢測(cè)技術(shù)，以確保不遺漏任何一個(gè)HIV拷貝，包括血液和已知的的HIV病毒會(huì)感染的所有器官。結(jié)果顯示，治療組的10只小鼠中有6只體內(nèi)的HIV病毒被完全清除，再次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，9只接受治療的小鼠中有5只體內(nèi)的HIV病毒被完全清除。
研究團(tuán)隊(duì)表示，這種治療策略的優(yōu)點(diǎn)有兩方面，首先，CRISPR基因編輯仍然是永久清除HIV病毒的優(yōu)選方法，其次，通過(guò)CRISPR基因編輯敲除CCR5，可以進(jìn)一步促進(jìn)對(duì)HIV病毒的清除。至于為什么還有一部分小鼠模型在治療后仍出現(xiàn)了HIV病毒的反彈，很可能是藥物遞送系統(tǒng)的效率還不足。這種CRISPR+抗逆轉(zhuǎn)錄病毒的組合療法的有效性是毫無(wú)疑問的，但還需要一個(gè)更高效的遞送系統(tǒng)。
值得一提的是，研究團(tuán)隊(duì)基于這些成果創(chuàng)立了一家名為Excision BioTherapeutics的公司，并在2021年獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)開展基于CRISPR基因編輯的艾滋病治療臨床試驗(yàn)。該療法目前正處于1/2期臨床試驗(yàn)中。此外，由于研究中使用的腺相關(guān)病毒載體（AAV）只能一次性給藥，研究團(tuán)隊(duì)也在開發(fā)可重復(fù)給藥的納米載體，以及其他病毒類載體。
除了治療艾滋病，Excision 公司的研發(fā)管線還包括使用CRISPR基因編輯技術(shù)清除乙肝病毒（HBV）、單純皰疹病毒（HSV）、乳頭多瘤空泡病毒（JCV）等。
聲明：本文版權(quán)歸原作者所有，轉(zhuǎn)載文章僅為傳播更多信息，如作者信息標(biāo)記有誤，或侵犯您的版權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系我們，我們將在及時(shí)修改或刪除內(nèi)容，聯(lián)系郵箱：marketing@360worldcare.com
