在本研究中，考慮到ICC的特點(diǎn)和circRNA具有細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外作用的發(fā)現(xiàn)，研究人員探索了特洛伊木馬納米治療策略。首先，研究人員通過裝載si-cPKM和紫杉醇這兩個“先鋒戰(zhàn)士”，合成了葉酸共軛納米系統(tǒng)作為特洛伊木馬。利用納米粒子的高穿透性和靶向性，該納米系統(tǒng)安全有效地將其帶入固體ICC腫瘤，如特洛伊城。然后，通過ICC類器官模型和多種小鼠ICC腫瘤模型，研究人員證明了si-cPKM聯(lián)合紫杉醇不僅可以內(nèi)部殺死ICC，還可以減少ICC腫瘤間質(zhì)纖維化，增加微血管開放，從而為藥物治療打開大門。外部主要力量(external main force, GC)可以通過打開的大門涌入ICC，從而達(dá)到顯著的治療效果，提高ICC小鼠模型的存活率。該策略首次通過在ICC中共載siRNA和紫杉醇的納米系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了腫瘤對紫杉醇的有效敏化;它也是一個通過內(nèi)部和外部協(xié)同增強(qiáng)實(shí)現(xiàn)有效治療ICC。
siRNA/PTX共載納米顆粒的抗腫瘤作用
為了探索siRNA/PTX共載納米顆粒對ICC腫瘤的潛在治療作用，研究人員構(gòu)建了一個ICC類器官。研究人員發(fā)現(xiàn)si-cPKM-FA-LNPs抑制了類器官的生長，si-NC/PTX- fa - lnps的效果略好于游離PTX處理。si-cPKM/PTX-FA-LNP處理表現(xiàn)出更明顯的抑制作用。為了進(jìn)一步驗證siRNA/PTX-FA-LNPs的抗腫瘤作用，研究人員利用穩(wěn)定過表達(dá)cPKM的hcc -9810細(xì)胞建立了小鼠體內(nèi)ICC腫瘤模型。皮下異種移植物模型的結(jié)果與類器官模型相似。RNA-FISH實(shí)驗證實(shí)，si-cPKM- fa - lnps和si-cPKM/PTX-FA-LNPs有效地沉默了異種移植物中的cPKM。免疫組化染色顯示，si-cPKM- fa - lnps和si-cPKM/PTX-FA-LNPs可顯著降低STMN1和TGFB1的表達(dá)及AKT磷酸化。與對照組相比，si-cPKM- fa - lnp組ki -67陽性細(xì)胞數(shù)量減少，si-cPKM/PTX-FA-LNP組減少更為明顯。接下來，研究人員對LNPs的生物安全性進(jìn)行了評價。各組小鼠體重?zé)o明顯差異，心、肝、脾、肺、腎等主要臟器未見組織病理學(xué)異常。研究人員未觀察到血液生化參數(shù)如ALT、AST、BUN和CREA的顯著變化。這些結(jié)果表明納米顆粒沒有明顯的副作用，可以作為一種安全的藥物進(jìn)一步在體內(nèi)應(yīng)用。
